DNaseI

DNaseI

 Số Cat.                                    Khối lượng                           

 G028                                      1.0ml; 2000U           

 Mô tả:  DNase I là một endonuclease có tác dụng phân cắt DNA mạch đôi trong điều kiện có sự hiện diện của các cation hoá trị 2, tạo ra các oligonucleotides có đầu 3’ –OH. Trường hợp có sự hiện diện của Mg²⁺, phản ứng sẽ tạo ra vết cắt trên DNA mạch đôi. Trường hợp có sự hiện diện của Mn²⁺, phản ứng sẽ cắt DNA mạch đôi thành mạch đơn.

Thành phần: DNase I (trọng lượng phân tử là 31,000 Daltons):

                   2000U DNase trong 10mM Tris-HCl pH7.6, 2mM CaCl2, 50% glycerol

                   10X DNase Reaction Buffer:

                   100mM Tris-HCl pH 7.6, 25mM MgCl₂, 5mM CaCl₂ trong ddH₂O

Quy trình:  

                - 1U (0.5ul) DNase phân cắt được 1ug lamda DNA ở 37⁰C sau 10’ phản ứng trong 50ul buffer chứa 10mM Tris-HCl pH 7.6, 25mM MgCl₂, 5mM CaCl₂ trong ddH₂O.

                - Điều kiện phản ứng: Ca²⁺ và Mg²⁺ hay Mn²⁺

                    ^- Dung dịch ngưng phản ứng: 20mM EDTA pH 8.0

                - Nhiệt độ ức chế phản ứng: 65⁰C sau 10’ trong sự hiện diện của dung dịch ngưng phản ứng.

                - Chất ức chế: EGTA, EDTA, nồng độ muối cao trên 100mM có thể giảm hoạt động của DNase.

Bảo quản:  Bảo quản ở nhiệt độ -20°C. Hạn chế sốc nhiệt. Hạn sử dụng 1 năm sau ngày mở nắp.